基因工程及其应用

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第2节 基因工程及其应用抗虫害的玉米基因工程：又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。

通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的性状。原 理：操作水平：操作环境：结 果： 基因重组。DNA分子水平。生物体外。定向地改造生物的性状，获得人类所需要的品种。二、基因工程的操作工具一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子。特点：(专一性)主要是从原核生物中分离和纯化来源:1、“基因剪刀”——限制性核酸内切酶(限制酶)实例:大肠杆菌的一种限制酶(EcoRⅠ) 能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。(黏性末端)(黏性末端)磷酸二酯键什么叫黏性末端？被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端？不同的限制酶呢？练习使用EcoRI 剪切目的基因黏性末端要想获得某个目的基因必须要用限制酶切几个切口？

可产生几个黏性末端？一个目的基因有几个黏性末端？XbaⅠNdeⅠ学以致用：2、“基因针线”——DNA连接酶脱氧核糖和磷酸交替连接的DNA骨架的缺口磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键使用DNA连接酶制作重组DNA分子甲片段作为运载体必须具备哪些条件？3、基因的运输工具——运载体①能够复制并稳定地保存。

②具限制酶切点，以便与外源基因连接。

③具有某些标记基因，便于进行筛选。

如抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等。常用的运载体：质粒、噬菌体和动植物病毒；

最常用的质粒是大肠杆菌的质粒。质粒细菌细胞内一种自我复制的环状双链DNA分子，能稳定地独立存在于染色体外，并传递到子代。

现在常用的质粒大多数是经过改造或人工构建的，常含抗生素抗性基因，是重组DNA技术中重要的工具。大肠杆菌的质粒：最常用的质粒是大肠杆菌的质粒，其中常含有抗药基因（又称标记基因），如四环素抗性基因，携带这个基因的细菌对四环素具有抗药性。（标记基因）三、基因操作的基本步骤：1、提取目的基因

2、目的基因与运载体结合

3、将目的基因导入受体细胞

4、目的基因的表达与鉴定目的基因1、提取目的基因2、目的基因与运载体结合3、将目的基因导入受体细胞4、目的基因的检测与鉴定基因工程操作基本步骤:四、基因工程的应用1、基因工程在农业上的应用2、基因工程在畜牧业上的应用3、基因工程在药物研制的应用胰岛素——治疗糖尿病的特效药干扰素——抗病毒的特效药人造血液及其生产白细胞介素、溶血栓剂、凝血因子、人造血液代用品疫苗：

乙肝、狂犬病、百日咳、霍乱、伤寒、疟疾基因工程药品4、基因工程在环境保护中的应用5、基因工程的其他应用

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